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當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 核酸合成與提取 > DNA提取 > AN19L050、AN19L05110×細(xì)胞/病毒裂解試劑盒

10×細(xì)胞/病毒裂解試劑盒

簡(jiǎn)要描述:李記生物的10×裂解液(10×Lysis Buffer)是一種比較強(qiáng)烈的細(xì)胞/病毒裂解液,主要成分為T(mén)ris-HCl、SDS以及Tween-20、EDTA等。裂解液裂解得到的核酸樣品可以用于常規(guī)的PCR、qPCR、ddPCR等。

  • 產(chǎn)品型號(hào):AN19L050、AN19L051
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-09-27
  • 訪  問(wèn)  量:304

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細(xì)介紹

品牌Life-iLab/李記生物貨號(hào)AN19L050、AN19L051
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述

李記生物的細(xì)胞/病毒裂解試劑盒(10×Lysis Buffer)是一種比較強(qiáng)烈的細(xì)胞/病毒裂解液,主要成分為T(mén)ris-HCl、SDS以及Tween-20、EDTA等。裂解液裂解得到的核酸樣品可以用于常規(guī)的PCR、qPCR、ddPCR等。

本產(chǎn)品可以用于細(xì)胞/病毒樣品。

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

10×細(xì)胞/病毒裂解試劑盒(10×Lysis buffer)

AN19L050

1mL

10×細(xì)胞/病毒裂解試劑盒(10×Lysis buffer)

AN19L051

2*1mL

產(chǎn)品組分

組分

AN19L050

AN19L051

儲(chǔ)存條件

A.  10×裂解液

1 mL

2*1 mL

-20℃

B.  Proteinase K

20 mg/mL

20 mg/mL

4℃或室溫

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。組分A在-20℃保存,組分B在4℃或室溫保存,有效期12個(gè)月。

使用方法

1.  從冰箱中取出10×裂解液,置于室溫條件下溶解,渦旋混勻后待用。

2.  10×裂解混合液配制:裂解試劑的單位使用量見(jiàn)下表,可按實(shí)際用量的1.1倍配制混合液,根據(jù)實(shí)際樣本量(N),取相應(yīng)體積的10×裂解液和Proteinase K(Proteinase K在使用前加入),渦旋振蕩混勻后使用。Proteinase K用量可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整。


單位用量

實(shí)際用量(1.1×N)

10× Lysis Buffer(10*)

1.8

1.98N

Proteinase K

0.2

0.22N

3.  操作步驟

3.1  病毒樣本

取病毒溶液18μl和10×裂解液(含Proteinase K)混合液2μl,建議裂解條件如下,實(shí)際裂解條件可根據(jù)裂解體積作相應(yīng)調(diào)整。


溫度

時(shí)間

消化

68℃

15min

滅活

98℃

3min

3.2  細(xì)胞樣本

3.2.1   1×裂解液(含Proteinase K)配制

實(shí)驗(yàn)前根據(jù)實(shí)際需要,使用PDB(和元生物貨號(hào):RP004)或PBS,將步驟2配制好的10×裂解混合液,稀釋至1×裂解混合液。

3.2.2   樣本前處理

①貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍,胰mei消化后離心收集細(xì)胞。

②懸浮細(xì)胞:400g離心5min收集細(xì)胞,輕輕渦旋振蕩或者彈擊管底以把細(xì)胞盡量分散開(kāi)。

3.2.3   樣本裂解

按照<1E7細(xì)胞量每孔加入100 μl的1×裂解液,渦旋振蕩15s充分裂解細(xì)胞,充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成<1E7細(xì)胞/管,然后再進(jìn)行裂解。建議裂解條件如下,實(shí)際裂解條件可根據(jù)裂解體積作適當(dāng)調(diào)整。


溫度

時(shí)間

消化

55℃

60min

滅活

95℃

15min

4.  樣品充分裂解后稀釋10倍,可直接用于下游的PCR擴(kuò)增。

注意事項(xiàng)

1.  本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.  為取得最佳的使用效果,盡量避免反復(fù)凍融,建議分裝后使用。

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

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